Подлинная инженерная инженерия генов: ключевые технологии для животных клеток Pha Wang Tianyun Книжный магазин Промышленная химическая индустрия издательство книги книги чтения Laer
Вес товара: ~0.7 кг. Указан усредненный вес, который может отличаться от фактического. Не включен в цену, оплачивается при получении.
Описание товара
| Заголовок: | Генная инженерия: ключевые технологии для фармацевтических препаратов на животных клетках: ключевые технологии для фармацевтических препаратов на животных клетках |
| Автор: | Ван Тяньюнь, Цзя Яньлун, Ян Юнь и др. |
| Издательство: | Химическая промышленность пресса |
| Дата публикации: | 2024-01-01 |
| Издание: | |
| ISBN: | 9787122433237 |
| Рыночная цена: | 128.0 |
Глава Культура клеток животных 001
Раздел Основы культуры клеток животных 002
1. Основные понятия 002
2. Условия культивирования клеток животных 003
3. Лаборатория культивирования клеток животных 004.
4. Асептическая техника 006
Раздел «Технологии культивирования клеток животных» 007
1. Криоконсервация и восстановление клеток животных 007
2. Передача животных клеток 009
3. Акклиматизация суспензии клеток животных и бессывороточная культура 011.
4. Периодическая культура клеток животных 015.
5. Периодическая культура клеток животных с подпиткой 016.
6. Технология перфузии клеток животных 022.
Раздел 3 Биологический анализ клеток животных 025
1. Кривая роста клеток животных и анализ времени удвоения 025
2. Анализ пролиферации клеток животных 028.
3. Обнаружение апоптоза клеток животных 031
4. Обнаружение клеточного цикла животных 036
Ссылки 038
Глава Векторы Клеток Животных 041
Раздел «Конструирование плазмидного вектора» 042
1. Получение целевого гена 042.
2. Переваривание эндонуклеазой рестрикции 046
3. Соединить целевой фрагмент и вектор 048.
4. Рекомбинантная трансформация 050.
5. Скрининг рекомбинантных векторов 052
6. Идентификация рекомбинантного вектора 052
Раздел «Конструирование вирусных векторов» 056
1. Бакуловирусный вектор экспрессии 056.
2. Лентивирусный вектор 057.
3. Аденовирусный вектор 059.
4. Ретровирусные векторы 060
Ссылка 061
Глава 3. Введение в целевой ген 065
Раздел Трансфекция клеток животных 066
1. Трансфекция липофектамином 066
2. Трансфекция полиэтиленимином 067
3. Электропорация и трансфекция 068
4. Факторы, влияющие на трансфекцию клеток 069
Обнаружение эффективности трансфекции ганглиозных клеток 070
Обнаружение цитометра 071
2. Обнаружение флуоресцентным микроскопом 071
Ссылки 072
Глава 4. Скрининг и оценка рекомбинантных стабильных клеточных линий 075
Секция «Скрининг пула рекомбинантных стабильных клеток» 076
1. Часто используемые маркеры скрининга антибиотиков 076
2. Генетический скрининг 078
3. Скрининг DHFR 079
4. GS-скрининг 080
Раздел «Выделение рекомбинантных моноклональных клеточных линий» 081
1. Метод ограниченного разведения 081
2. Технология флуоресцентной сортировки проточной цитометрии 082
3. КлонПикс 083
4. Метод кольца клонирования 084.
5. Другие методы скрининга 085
Раздел 3 Оценка рекомбинантных стабильных клеточных линий 086
1. Обнаружение загрязнения клеток 086
2. Идентификация сотовой линии 087
3. Анализ интеграции чужеродных генов 089
4. Анализ экспрессии рекомбинантного белка 098
Ссылки 101
Глава 5. Выделение и очистка рекомбинантных белков 103
Раздел «Стратегии и оборудование для очистки рекомбинантных белков» 104
1. Стратегия очистки рекомбинантных белков 104
2. Оборудование для очистки рекомбинантных белков 107
Раздел Технология осаждения рекомбинантных белков и мембранного разделения 116
1. Метод осаждения белков 117
2. Технология мембранного разделения 118
Раздел 3 Технология разделительной хроматографии рекомбинантных белков 119
1. Аффинная хроматография 120
2. Гидрофобная хроматография 122.
3. Гель-фильтрационная хроматография 124.
4. Ионообменная хроматография 126.
5. Обращенно-фазовая хроматография 129.
Ссылки 131
Глава 6. Идентификация и анализ рекомбинантных белков 135
Секция «Физика и химия белков», спец. 136
1. Определение молекулярной массы 136
2. Анализ изоэлектрической точки и зарядовой неоднородности 141
3. Анализ пептидной карты 144
4. Анализ аминокислотного состава 145
5. N-концевое секвенирование аминокислот 150.
6. Секвенирование С-концевой аминокислоты 152
7. Анализ дисульфидных связей 153
8. Структурный анализ 155
Раздел «Анализ содержания белков» 159
1. Метод определения азота по Кьельдалю 159
2. Метод Лоури 161
3. Закон 162 BCA
4. Брэдфорд Лоу 164
5. Метод УФ-поглощения 166
6. Жидкостная хроматография 166.
Раздел 3 Анализ чистоты белка 168
1. Анализ белковых остатков клетки-хозяина 168
2. Анализ остатков ДНК клетки-хозяина 170
3. Обнаружение остаточных антибиотиков 172
4. Тестирование других ингредиентов 173
Раздел 4. Анализ модификации гликозилирования 181
1. Технология разделения, обогащения и сродства 182
2. Методы идентификации гликопротеинов/определение сайтов гликозилирования 187
3. Анализ структуры сахарной цепи 189
Раздел 5. Измерение биологической активности 206
1. Оценка in vitro 207
2. Оценка in vivo 211
Раздел 6 Специальный иммунохимический анализ 213
1. Определение родства 213
2. Определение антигенсвязывающего эпитопа 217
Ссылка 219
Глава 7. Новые технологии получения рекомбинантных белков 223
Раздел Искусственный интеллект и белковый дизайн 224
1. Базы данных, связанные с нуклеотидами и белками 224
2. Анализ генной информации и оптимизация кодонов 226
3. Анализ информации о белках и предсказание структуры 241
4. Проектирование искусственного интеллекта 255
Раздел «Скрининг и применение микроРНК» 269
1. скрининг микроРНК 269
2. применение микроРНК 273
Раздел 3. Технология редактирования генов 279
1. Нокаут гена CRISPR в клетках животных 279
2. Нокаут генов животных клеток 289
Раздел 4 Эпигенетические технологии 299
1. Анализ метилирования ДНК 299
2. Анализ модификации гистонов 305
3. Анализ некодирующей РНК 314
Раздел 5. Анализ ДНК-белкового взаимодействия 323
1. Эксперимент по миграции геля 323
2. Эксперимент по следу ДНКазыⅠ 330
3. Дрожжевая одногибридная система 337
4. Иммунопреципитация хроматина 351
5. Технология фагового дисплея (взаимодействие ДНК и белка) 354
Ссылка 356
Приложение 1. Приготовление обычно используемых буферов и реагентов 363
Приложение 2. Китайский и английский глоссарий 369
Книга «Генная инженерия – ключевые технологии для фармацевтических препаратов на животных клетках» посвящена ключевым технологиям получения рекомбинантных белков с использованием систем экспрессии клеток животных. В нем подробно представлены ключевые технологии и новые технологии в этой области с таких аспектов, как культура клеток животных, векторы клеток животных, введение целевых генов, скрининг и оценка рекомбинантных стабильных клеточных линий, выделение и очистка рекомбинантных белков, идентификация и анализ рекомбинантных белков, а также новые технологии для рекомбинантных белков.
Базовые знания о культуре клеток членистоногих.
1. Основная концепция
Культура клеток животных подразумевает диссоциацию тканей животных с использованием ферментативных или механических методов, удаление клеток и последующее помещение их в подходящую среду для роста. Также можно использовать известные штаммы или клеточные линии животных. После того как клетки животных выделены из тканей животных и им предоставлена возможность пролиферировать в соответствующих условиях до тех пор, пока они не займут все доступные субстраты (то есть не достигнут конфлюэнтного состояния), стадия культивирования называется первичной культурой.После первичной культуры клетки животных переносят в новый контейнер и заменяют свежей средой для субкультивирования клеток. После пассажа первичную культуру называют линией или субклоном клеток животных.Нормальные линии клеток животных обычно могут делиться только ограниченное количество раз, прежде чем теряют способность к пролиферации; такие клеточные линии называются конечными клеточными линиями.Некоторые линии клеток животных могут быть трансформированы в бессмертные клеточные линии посредством процесса трансформации.Этот процесс может происходить естественным путем или посредством химической или вирусной индукции.После трансформации ограниченных клеточных линий они приобретают способность делиться бесконечно и становятся неограниченными клеточными линиями.
По морфологии клеток животных культивируемые клетки животных можно разделить на три категории: фибробласты — биполярные или мультиполярные клетки, вытянутые, прикрепленные к матриксу и растущие;эпителиоподобные клетки имеют многоугольную форму и более правильную форму, прикреплены к матриксу и растут разрозненными участками; лимфобластоидные клетки имеют сферическую форму, обычно растут во взвешенном состоянии и не прикреплены к поверхности матрикса.
……
1. Эта книга отражает новый прогресс в генной инженерии за последние десять лет.
2. В этой книге собраны достижения и технологии генной инженерии.
3. Сильное содержание и практичность в области генно-инженерных исследований.
